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Actividad Enzimática: Indicador biológico de la calidad del suelo

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La determinación de la actividad enzimática del suelo es una de las formas de evaluar la actividad de los microorganismos y se caracteriza como uno de los tipos de análisis microbiológicos del suelo. El conteo de microorganismos y el análisis genético también son tipos de análisis microbiológicos, utilizados para evaluar la "salud" del suelo.

 

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Con el fin de agregar el componente biológico a los análisis de suelos de rutina, el uso del análisis microbiológico de suelos ha ido creciendo a un ritmo acelerado, maximizando la evaluación de la calidad y el potencial productivo del suelo.

 

La gran ventaja de incluir indicadores microbiológicos es que son más sensibles que los indicadores químicos y físicos, señalando con mayor anticipación los cambios que se producen en el suelo, debido a su uso y manejo.

 

Actividad enzimática

Aunque el recuento de microorganismos es simple, puede subestimar la comunidad microbiana, ya que algunas especies no crecen en medios de cultivo artificiales. Además, el recuento por sí solo no demuestra el nivel de actividad de los microorganismos, lo que requiere el uso de parámetros como la tasa de fijación de nitrógeno, la respiración microbiana, la actividad enzimática, etc.

 

La actividad enzimática del suelo es el resultado de la suma de la actividad enzimática de los organismos vivos (plantas, microorganismos y animales) y de las enzimas abióticas (enzimas asociadas a la fracción no viva) que se acumulan en el suelo, protegidas de la acción de las proteasas, mediante adsorción sobre partículas de arcilla y materia orgánica del suelo (MENDES et al., 2015).

 

Después de 21 años de estudio, en 2020 Embrapa lanzó BioAS – Tecnología de Bioanálisis de Suelos. Considerada una iniciativa pionera en el mundo, BioAS se basa en el análisis de la actividad de las enzimas arilsulfatasa y beta-glucosidasa, asociadas a los ciclos del azufre y del carbono, respectivamente.

 

La arilsulfatasa y la beta-glucosidasa están directa o indirectamente relacionadas con el potencial productivo y la sostenibilidad del uso de la tierra, funcionando como bioindicadores y brindando parámetros para evaluar la salud del suelo.

Diagrama de flujo que demuestra que el aumento de la actividad biológica es el primer paso en la escalada de la mejora del suelo. Fuente: Extraído de Mendes et al., 2018

 

Embrapa estableció valores de referencia para las enzimas en diferentes suelos, con el fin de evaluar el estado de su funcionamiento biológico. Altos valores de actividad enzimática indican el uso de prácticas adecuadas y sostenibles de manejo del suelo. Por el contrario, los valores bajos sirven como advertencia al agricultor para una reevaluación del sistema de producción hacia la adopción de buenas prácticas de manejo.

 

Los valores de referencia de la actividad enzimática en el suelo varían según las diferentes condiciones edafoclimáticas y los diferentes cultivos. Aunque la determinación de enzimas se puede realizar para varias áreas, actualmente, la interpretación de los resultados propuestos por Embrapa está formateada para cultivos anuales de granos y fibras cultivados en el bioma Cerrado y en el estado de Paraná.

 

Método de determinación

Los métodos de determinación de arilsulfatasa y beta-glucosidasa utilizados en el protocolo del IAC (Instituto Agronómico de Campinas) y Embrapa se basan en el método descrito por Tabatabai (1994). Sin embargo, hay una diferencia, que es la omisión/eliminación del tolueno en el procedimiento utilizado por la técnica BioAS de Embrapa.

 

La metodología se basa en la incubación de muestras de suelo a una temperatura de 37°C con una solución tamponada de sustratos específicos para cada enzima, promoviendo la liberación de p-nitrofenol, que se determina por colorimetría, a través de un espectrofotómetro digital UV/VIS.

 

Para incubar las muestras, se puede utilizar una incubadora, modelo TE-371/240L.

Además, son necesarios los equipos adicionales como agitador de tubos, modelo AP-56/1, baño maria digital, modelo TE-054-MAG o TE-056-MAG, y una balanza analítica.

La fosfatasa ácida es una enzima que se encuentra en el suelo, pero no está incluida en la tecnología de Embrapa, ya que es una enzima inestable y está influenciada por el pH del suelo (cuando aumenta el pH, el nivel de actividad de la fosfatasa ácida disminuye y viceversa). Sin embargo, la fosfatasa ácida se puede evaluar en demandas específicas, utilizando el mismo equipo que el anterior.

 

      ¿Cuál es el procedimiento para recolectar la muestra de suelo para el análisis enzimático?

Para el análisis enzimático del suelo, es fundamental que la profundidad de muestreo sea de 0 a 10 cm, porque esta es la capa de diagnóstico.

 

El procedimiento es similar al adoptado para el análisis químico del suelo. En áreas bajo cultivos anuales, se realizan colectas múltiples en hileras y entre hileras del último cultivo para formar una muestra de suelo compuesta por varias submuestras.

 

      ¿Cuál es el período de recolección del suelo?

La recolección del suelo debe realizarse de preferencia al final de la estación lluviosa, después de la cosecha del cultivo, coincidiendo con la toma de muestras para el análisis químico del suelo.

 

      ¿Se pueden almacenar muestras de suelo para análisis enzimático?

Lo ideal es enviar las muestras de suelo lo antes posible para su análisis. Si esto no es posible, las muestras de suelo se pueden almacenar en un lugar seco y ventilado, sin exposición directa al suelo.

 

      ¿En qué consiste la preparación de muestras de suelo para análisis de actividad enzimática?

La muestra de suelo recolectada debe secarse al aire y tamizarse a través de un tamiz de malla de 2 mm. Lima (2021) verificó que el secado en estufa a 40°C por dos días no provocó cambios significativos en la actividad enzimática. De esta forma, se puede utilizar una Estufa con circulación y renovación de aire, modelo TE-394/2-MP.

      ¿Cómo se hace la interpretación de los indicadores biológicos de la calidad del suelo?

Dentro de la tecnología BioAS, la interpretación se realiza a través de algoritmos basados ​​en análisis de regresión que evalúan la relación entre los niveles de actividad enzimática, el tipo y textura del suelo y el rendimiento de grano de los cultivos, así como entre los niveles de actividad enzimática. y materia orgánica del suelo. Con estas regresiones es posible delimitar clases de suficiencia para los bioindicadores (Muy Alta, Alta, Media, Baja y Muy Baja) como se muestra a continuación.

Informe y escala de calidad para clasificar los índices presentados en el informe BioAS. Fuente: Embrapa, 2021.

 

Consideraciones finales

La actividad enzimática es un indicador de la calidad del suelo que se puede determinar fácilmente en el laboratorio, sin embargo, para que se convierta en una herramienta común, la investigación debe seguir avanzando.

 

La profundización de las investigaciones permitirá la parametrización de valores de referencia que sean compatibles con diversos tipos de suelos y cultivos, incentivando el análisis de enzimas como parte de los análisis de rutina.

 

El análisis del componente biológico del suelo contribuye al establecimiento de métricas para la evaluación de prácticas más sostenibles como el uso de bioinsumos, por ejemplo, que pueden favorecer la diversidad biológica y funcional del suelo.

 

       

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Referencias

FRIGHETTO, R.T.S.; VALARINI, P.J. (Coords.). Indicadores biológicos e bioquímicos da qualidade do solo: manual técnico. Jaguariúna: Embrapa Meio Ambiente, 2000. 198p. (EMBRAPA Meio Ambiente – Documentos, 21).

 

EMBRAPA. Tecnologia BioAS: uma maneira simples e eficiente de avaliar a saúde do solo / Iêda de Carvalho Mendes ... [et al.]. – Planaltina, DF: Embrapa Cerrados, 2021. 50 p. (Documentos / Embrapa Cerrados, ISSN 1517-5111, ISSN online 2176-5081, 369

 

LIMA, A. C. A. Efeito da secagem das amostras de solo nos níveis de atividade das enzimas ß-glicosidase e arilsulfatase. 2021. 32 f., il. Trabalho de Conclusão de Curso (Bacharelado em Agronomia)-Universidade de Brasília, Brasília, 2021. Disponible en: https://bdm.unb.br/bitstream/10483/28444/1/2021_AnaCarolynaAlvesLima_tcc.pdf

 

MENDES, I. C.; DE SOUSA, D. M. G.; DOS REIS JUNIOR, F. B. Bioindicadores de qualidade de solo: dos laboratórios de pesquisa para o campo. Cadernos de Ciência & Tecnologia, v. 32, n. 1/2, 2015

 

MENDES, I. C. et. al. Bioanálise de solo: como acessar e interpretar a saúde do solo. Vol. Circular Técnica 38, pp. 24p. 2018. EMBRAPA, Brasília.

 

Silveira, A.P.D. et al. Determinação da atividade de enzimas em solos. Instituto Agronômico, Centro de Solos e Recursos Ambientais. Protocolo IAC, abril de 2022. Disponible en: http://lab.iac.sp.gov.br/Publicacao/ProtocoloIACEnzimasSolosAbril2022.pdf

 

Tabatabai, M. A. (1994). Soil Enzymes. In “Methods of Soil Analysis – Part 2 Microbiological and Biochemical Properties” (R. W. Weaver, S. Angle, P. Bottomley, D. Bezdicek, S. Smith, M. A. Tabatabai, A. Wollum, eds.), pp. 786-944. SSSA, Madison, WI.